Антитела к трихомонадам

Постановка ИФА к трихомонадам

В современной медицине наибольшее распространение получил иммуноферментный анализ.

Для этого теста характерны приемлемая точность, возможность количественной оценки уровня иммуноглобулинов и доступная стоимость.

Для проведения требуются:

К исследуемому материалу добавляется промышленная сыворотка.

В ней содержатся очищенные от примесей антигены Trichomonas vaginalis – классического возбудителя урогенитального трихомоноза и ферментный субстрат.

Если обследуемый человек инфицирован патогенными трихомонадами, то в набранном образце крови будут находиться антитела к этому микроорганизму.

Противотрихомонадные иммуноглобулины свяжутся с типовыми антигенами из сыворотки и образуют комплекс антиген-антитело (Аг-Ат).

А на появление этих комплексов отреагирует ферментный субстрат и изменит цвет – положительный результат пробы.

Зафиксировать изменения можно при помощи фотоколориметра (более чувствительный способ) или невооруженным взглядом при постановке теста в лунке планшета (менее чувствительный подход).

Если же в организме обследуемого человека нет Trichomonas vaginalis, то есть он здоров и антител не будет.

Комплекс Аг-Ат не образуется, ферментный субстрат остается интактным, изменений не происходит.

Это тоже фиксируется, а полученный результат рассматривается как отрицательный.

Достоверность полученных результатов на антитела к трихомониазу

Несмотря на тщательность лабораторных исследований, ИФА не является абсолютно точным анализом.

Почему же его используют?

Потому что с другими пробами, относительно чувствительности и специфичности дела обстоят еще хуже.

Современная модификация ИФА обеспечивает 100% специфичность и 90% чувствительность.

Это означает, что при наличии в крови пациента противотрихомонадных антител, тест в 90 пробах из 100 их найдет.

Но если иммуноглобулинов к трихомонадам нет, то ложного срабатывания не произойдет.

Определение классов антител к трихомонадам

Чем еще подкупает ИФА, так это способностью дифференцировать классы иммуноглобулинов.

Организм вырабатывает разные типы этих белков в разные сроки:

• IgA – появляются первыми в течение 5 дней от заражения трихомонозом
• IgM – тоже обнаруживаются уже на первой неделе заболевания
• IgG – их синтез начинается с 10-14 дней и продолжается д тех пор, пока организм полностью не очистится от возбудителя

Определение класса антител к патогенным трихомонадам бывает необходимо для различения новых случаев заражения и старых, хронических.

Результаты оценивают так:

Выявить антитела к трихомонадам позволяют еще несколько диагностических методик.

Это такие техники, как:

• РСК
• РПГА
• РИФ

Рассмотрим данные методы диагностики подробнее.

Реакция связывания комплемента к трихомонаде (РСК)

Относится к другому виду выявления антител в крови пациента.

Для этого метода используется два вида сывороток: диагностическая и индикаторная.

Диагностическая сыворотка представляет собой совокупность антигенов к трихомонаде. При добавлении диагностикума к сыворотке больного происходит взаимодействие антигена и антитела.

Затем, система комплемента связывает этот комплекс.

Второй этап реакции заключается в добавлении индикаторной сыворотки.

Она представляют собой эритроциты барана (антиген) и сыворотку с антителами к этому антигену.

Иначе говоря, образуется еще один иммунный комплекс антиген-антитело.

В случае если в первой реакции не образовалось комплекса АГ-АТ, комплемент соединится со вторым комплексом и произойдет гемолиз эритроцитов.

Это называется отрицательной реакцией.

Отсутствие гемолиза – реакция положительна.

РСК для диагностики трихомониаза проводится нечасто.

Причина этому - стоимость проведения анализа.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

Для этого метода используется эритроцитарный диагностикум.

Он представляет собой эритроциты с адсорбированными антигенами к трихомонаде.

В случае добавления к сыворотке с антителами пациента, происходит разрушение эритроцитов.

Выпадение происходит в виде фестончатого осадка.

Это называется положительной реакцией.

В случае отрицательной  - эритроциты осаживают в виде пуговки.

 Специфичность и чувствительность для диагностики трихомониаза высокая.

Реакция иммунофлюоресценции  для выявления антител к трихомонаде (РИФ)

Основан на добавлении к сыворотке пациентов меченых антигенов (АГ).

Данные АГ способны светиться в УФ-лучах.

Метод обладает высокой точностью и специфичностью.

Данные методики используются для подтверждения диагноза.

Важно! Если вы сомневаетесь, какой вид исследования следует провести, проконсультируйтесь со специалистом!

Титрование антител к трихомонадам

Но еще более полезна возможность осуществить количественную оценку IgG - титрование.

Если образец крови положительный, то его разводят в два раза специальным буферным раствором и снова ставят пробу.

Разведение повторяют каждый раз до тех пор, пока не будет получен отрицательный результат.

Это и есть показатель титра.

По мере лечения трихомониаза, количество возбудителей уменьшается, одновременно снижается концентрация антител к ним.

Это означает, что при повторном титровании, для получения отрицательного результата потребуется меньшее число разведений.

Такая динамика указывает на адекватную терапию и служит показателем эффективности лечения.

Одновременно, если титр не снижается, то следует корректировать схему лечения.

Для этого провести культуральное исследование и определить чувствительность трихомонад к противомикробным средствам.

Грамотное применение метода ИФА помогает не только выявить бессимптомных носителей инфекции.

А так же проконтролировать эффективность противотрихомонадного лечения.

Сложности Интерпретации Серологических Тестов

Несмотря на прогресс в разработке серологических методов, их интерпретация при диагностике трихомониаза сопряжена с рядом сложностей.

1. Перекрестные Реакции

T. vaginalis имеет общие антигены с другими микроорганизмами, особенно с другими видами трихомонад (например, Trichomonas hominis, Pentatrichomonas hominis) и некоторыми бактериями. Это может приводить к ложноположительным результатам, когда антитела, выработанные против других микроорганизмов, реагируют с антигенами T. vaginalis в серологических тестах.

2. Отсутствие Дифференциации между Текущей и Перенесенной Инфекцией

Как и большинство серологических тестов, выявление антител к T. vaginalis не позволяет точно определить, является ли инфекция активной в данный момент, или же это следствие ранее перенесенного заболевания. Антитела IgG могут сохраняться в крови в течение многих месяцев или даже лет после элиминации паразита. Это ограничивает использование серологических тестов для мониторинга эффективности лечения.

Как меняется количество антител к трихомонаде после лечения

При соблюдении адекватного режима и длительности лечения возможно полное избавление от инфекции.

При этом полезно знать сроки исчезновения антител при естественном течении заболевания.

Сроки исчезновения антителв зависимости от периода заболевания

IgM  появляются на 5 день заболевания и свидетельствуют о недавнем инфицировании и развитии острого заболевания.

Как правило, максимальный титр данных антител развивается на 2 неделе и начинает постепенно снижаться.

Иммуноглобулины класса M исчезают из крови примерно к 3-4 неделе заболевания.

IgA имеет схожую характеристику.

Они появляются на первой неделе инфицирования.

Максимальный титр обнаруживается к 10-14 дню.

Исчезают эти антитела из крови через месяц.

Иммуноглобулины класса G имеют другую тенденцию развития.

Как уже было сказано, они могут быть обнаружены уже на 2 неделе заболевания.

Однако титр их увеличивается и достигает максимума только к 3-4 неделе.

Затем антитела класса G постепенно снижаются и могут оставаться долгое время неизменными.

Таким образом, обнаружение IgG не говорит о наличии самого микроба в организме.

Может свидетельствовать как о хроническом течении заболевания, так и о перенесенной инфекции.

Что происходит с уровнем антител после лечения

Все зависит от времени проведения лечения.

В случае приема препаратов уже в периоде острой инфекции – уровень IgM снижается быстро.

IgG появляются в незначительном количестве и могут не достигнуть диагностического титра.

Проведение лечения в период хронического течения либо носительства приводит к уменьшению уровня IgG.

Необходимо помнить!

После лечения нахождение IgG не говорит о персистировании инфекции.

Эффективность препарата в период лечения хронической инфекции оценивается в снижении титра IgG.

Случай,  когда антитела к трихомонадам отрицательные, а ПЦР положительный

Выработка антител зависит от состояния иммунитета отдельного человека.

В случае наличия иммунодефицитных состояний может не происходить диагностически значимого нарастания уровня антител.

Иммунодефицитные состояния могут быть обусловлены перенесенными в недавнем времени бактериальными и вирусными инфекциями, наличием хронического стресса.

Применение иммуносупрессивной терапии, наличие в организме ВИЧ–инфекции может послужить причиной дисбаланса иммунной системы.

В таком случае ПЦР диагностика является наиболее точным методом выявления трихомонады.

Чувствительность и специфичность  ее приближается 100%.

Антитела к трихомонадам положительные, а ПЦР отрицательный

ПЦР диагностика заключается в выявлении генетического материала самого микроорганизма.

Говорит о наличии либо отсутствии инфекции в организме.

Ниже разберем несколько случаев результатов анализов.

Вариант, когда ПЦР отрицательный, а IgM и IgG к трихомонаде положительные.

Данный результат говорит о неквалифицированном заборе материала либо о неправильном проведении анализа.

Случай, когда ПЦР  и IgM отрицательные, а IgG положительные.

Такая ситуация имеет место быть при наличии в анамнезе перенесенного трихомониаза, периоде реконвалесценции заболевания.

Как убрать антитела к трихомонадам из крови

Уровень антител вырабатывается  иммунной системой индивидуально у каждого человека.

При проведении адекватного лечения антитела класса M и А быстро уменьшаются и исчезают из крови.

Иммуноглобулинны G могут долгое время сохраняться в крови даже после квалифицированного лечения.

У отдельной категории граждан, после приема противотрихомонадных препаратов антитела всех классов могут исчезать.

У другой половины -  сохраняться в течение нескольких месяцев и лет.

Какой врач назначает определение антител к трихомонаде

Лечением венерических инфекций занимается дерматовенеролог.

Однако для проведения диагностики обращайтесь в специализированную клинику.

Специалисты назначат необходимые анализы и интерпретируют результаты.

При необходимости сдать анализы на антитела к трихомонадам в Москве, обращайтесь в нашу клинику.