Результаты анализов ПЦР

ПЦР-исследования уже долгое время входят в спектр лабораторно-диагностических исследований различных заболеваний.

За несколько десятилетий развития и совершенствования, методика стала для дерматовенерологической службы незаменимой.

В данной статье вы узнаете

Что представляют из себя ПЦР исследования и их результаты.

Полимеразная цепная реакция - это метод диагностики, позволяющий идентифицировать возбудителя того или иного заболевания.

Искомым фактором служат уникальные последовательности генетического материала, которые присутствуют в микробной клетке только одного вида или штамма патогенных микроорганизмов.

Чаще всего целью исследования является ДНК бактерии или вируса, но метод ПЦР предоставляет результаты и по РНК микроорганизмов.

Для чего используются различные биологические материалы:

• слюна
• биоптат ткани
• моча
• спинномозговая жидкость
• кровь
• соскобы со слизистых оболочек

Результаты ПЦР диагностики представляют собой

данные о наличии или отсутствии заболевания это – наиболее простая, доступная информация.

Есть такие методики ПЦР, результаты анализов которых кроме установления самого факта инфицирования, позволяют оценить активность инфекции, динамику болезни и отклик на проводимое лечение.

Такой вариант называется «полимеразно-цепная реакция в реальном времени», максимально широко применяется в отношении пациентов с гемотрансмиссивными хроническими вирусными инфекциями – гепатитами, ВИЧ.

Главное преимущество методики – высочайшая чувствительность и специфичность.

Такие анализы быстро проводятся и очень точны.  

Представляя достоверные данные, позволяют начать лечение как можно раньше.

ПЦР исследование состоит из трех этапов:

• Подготовка образца после взятия материала.
• Собственно полимеразная реакция, которая состоит в многократном копировании фрагментов материала.
• Интерпретация результатов.

Результаты анализов ПЦР положительны, если предполагаемый возбудитель обнаружен.

Если же нет - результат отрицательный.

Как таковой, утвержденной формы бланка результатов анализов нет.

Это связано с тем, что исследование и фиксацию данных проводит компьютер.

Соответственно, графы и данные в бланк вносятся так, как предусматривает программное обеспечение, под управлением которого работает аппарат.

Поэтому расшифровка результатов анализов требует от врача особой подготовки и опыта.

В случае, когда проводится полимеразно-цепная реакция в реальном времени, в бланке результатов анализов еще отдельно указывается количество выявленных копий генетического материала искомого микроорганизма.

Разумеется, если таковые будут выявлены в принципе.

Положительный результат

Все возбудители венерических заболеваний и гемотрансмиссивных инфекций (гепатиты, ВИЧ), попав в организм человека начинают размножаться, но при этом никак себя не проявляют.

Здесь имеет место так называемый инкубационный период или торпидное, скрытое течение инфекции.

В подобных случаях ПЦР все равно находит в диагностическом материале генетические маркеры возбудителей уже через несколько дней от момента заражения.

Для того, чтоб анализ стал положительным, достаточно одной молекулы ДНК или РНК патогенного микроорганизма в собранном диагностическом материале.

Для многих ранних аппаратов существует технологический порог чувствительности в 40 микробных тел.

Но, как правило, если человек действительно заражен той или иной венерической болезнью или ЗППП, то у него возбудителей в пробах бывает больше этого числа и анализ будет положительный.

Отрицательный результат

По большому счету, такой вариант возможен в двух случаях: человек не заражен или неправильно собран диагностический материал.

Конечно, нельзя исключать, что концентрация возбудителей в исследуемой пробе может оказаться ниже, чем порог чувствительности аппарата.

Но такая ситуация встречается крайне редко, и если у доктора есть сомнения, то анализ всегда можно повторить спустя некоторое время.

Если результаты диагностики ПЦР останутся отрицательными, то человек здоров.

В противном случае, при получении вторых анализов положительными, это значит, что пациент заражен и необходимо начинать его лечение.

Расшифровывать результаты ПЦР анализа должен лечащий врач

Расшифровывать результаты ПЦР анализа должен лечащий врач, которому известен ход лечения.

Идеально, чтоб это был тот же специалист, который проводит сбор диагностического материала для проведения исследования, может наблюдать пациента и отслеживать все изменения в здоровье человека.

К сожалению, клиническое течение современных венерических заболеваний и инфекций сильно отличается от классического.

В таких случаях даже результаты анализов ПЦР необходимо подкреплять данными других исследований:

• микроскопия мазка отделяемого половых органов, из уретры
• серологические реакции крови на антитела к определенным возбудителям (ИФА, РПГА и другие)
• культуральный посев

Ситуации, когда данные разных методик противоречат друг другу, встречаются, к счастью, не часто. Например – ПЦР положительно, а ИФА положительно.

Такое бывает в конце лечения пациента, когда патогенные микроорганизмы уже уничтожены и в организме человека их нет.

Но антитела (иммуноглобулины) к антигенам возбудителей инфекции еще циркулируют в крови несколько недель или даже месяцев, лет.

При клиническом выздоровлении, такое несоответствие трактуется в пользу ПЦР, так как его результаты более точные, чем исследования на основании антител.

Культуральный посев считается наиболее чувствительным, но для получения его результатов приходится ждать несколько дней или даже недель.

Поэтому бактериологическое исследование проводится только тогда, когда ПЦР не может предоставить гарантированного точного ответа.

Важно уметь сопоставлять полученные данные анализов и клинические особенности протекания инфекции.

Так, в некоторых случаях результат ПЦР положителен, хотя возбудитель успешно элиминируется иммунной системой.

Так как пациент только что завершил лечение  в его организме еще сохраняются погибшие патогенные микроорганизмы.

Их геном будет обнаружен, но все равно  тогда положительный результат не означает наличие заболевания.

Ложноотрицательный результат ПЦР анализа возможен:

• при неправильном подходе к пациенту
• взятии материала не из нужной биологической среды

Очень большое значение имеет тщательное выяснение всех деталей и нюансов заболевания.

Особое внимание необходимо уделять тому, что и как применял человек от момента появления первых симптомов до обращения за квалифицированной медицинской помощью.

Например – антибиотики, которые можно купить в любой аптеке.

Самолечение часто приводит к значительному сокращению числа микробов из-за чего может случиться ложноотрицательный результат ПЦР анализа.

То есть роль человека, врача, сводится только к тому, чтоб правильно собрать диагностический материал и затем расшифровать полученные результаты.

Диагностические возможности метода

Этот способ лабораторных исследований очень универсален.

Существует ПЦР диагностика:

• инфекций, передаваемых половым путем.
  
• Также некоторых возбудителей респираторных заболеваний (коклюш, бронхосептикоз)
• особо опасных инфекций (ВИЧ), гепатитов
• возбудителей кишечных инфекций (ротавирусы, сальмонелла, Helicobacter pylori)
• вирусов гриппа и др