Диагностика трихомониаза

Трихомониаз- инфекционное заболевание, передающееся половым путем. Несмотря на то, что трихомониаз - наиболее распространенная венерическая болезнь, его диагностика требует самого серьезного подхода. Возбудитель – влагалищная трихомонада, протозойная (простейшая) одноклеточная форма жизни.

Существуют три типа трихомонад.

Они паразитируют в рту, желудочно-кишечном тракте, в анаэробной среде влагалища, предстательной железы, семенных пузырьках и мочеиспускательном канале.

Последняя вызывает урогенитальный трихомониаз.

Трихомонада не принимает форму цисты, соответственно, не способны существовать вне человеческого тела.

Очевидно, что для данной инфекции возможен исключительно половой путь передачи инфекции.

Инкубационный период колеблется от 3 до 30 дней.

Трихомониазом можно болеть несколько раз в жизни, так как иммунитета к данной протозойной инфекции не существует.

Клиническая диагностика трихомониаза

Многоочаговость трихомонадного поражения определяет разнообразие клинической картины.

При торпидной форме: скудные выделения из мочеиспускательного характера, легкая дизурия или отсутствие клинических проявлений

При каких симптомах сдают анализы на трихомониаз?

Трихомонадный уретрит у мужчин:

• Обильные гнойные или грязно-желтые выделения;
• Режущая боль при мочеиспускании;
• Моча мутная, с хлопьями.

Тотальный трихомонадный уретрит

• + учащенные мочеиспускания;
• + гематурия.

Трихомониаз у женщин складывается из вагинита, уретрита, эндоцервицита и эндометрита.

• Большое количество зловонных, раздражающих выделений;
• Постоянный зуд и экскориации в области гениталий;
• Мацерации и опрелости в промежности;
• Дизурия (жгучая боль при попытках помочиться)

Трихомониаз у девочек протекает в форме трихомонадного вульвовагинита.

В дополнение к клинике женского трихомониаза:

• Покраснение и отечность наружных половых органов, бедер и промежности;
• Эрозии и язвочки в области вульвы и влагалища;
• гнойные белесые выделения пенятся и вызывают раздражение кожи;
• Гнойные, пенистые, жидкие раздражающие выделения;

Свежий трихомониаз может перейти в хроническую форму, когда периоды бессимптомного течения сменяются обострением.

Факторы риска обострения:

• половое возбуждение и коитус;
• изменения гормональной функции яичников;
• прием алкоголя;
• изменение pH влагалища

Если все так очевидно, то зачем же нужна диагностика?

Существуют транзиторные формы заболевания, бессимптомное носительство, малосимптомное течение.

Для успешного лечения необходима точная диагностика.

Без лечения трихомониаз может привести к следующим осложнениям:

• Простатит
• Везикулит
• Стриктуры уретры
• Рак шейки матки
• Риск развития других ЗППП, в том числе ВИЧ

Трихомониаз: методы диагностики

Постановка диагноза трихомониаза опирается на клинические и лабораторные методы диагностики.

Клинические методы информативны в острой фазе.

При подостром, торпидном и хроническом течении, а также носительстве врач-венеролог опирается преимущественно на данные лабораторных тестов.

Применяют 4 лабораторно-диагностических метода:

• микроскопический,
• культуральный,
• иммунологический,
• генодиагностический.

Анализ на трихомонады также выполняется совместно с анализом на гонорею.

Культуральный метод и микроскопия при трихомониазе

Безусловным доказательством трихомониаза служит обнаружение простейших, в частности, урогенитальных трихомонад, в естественных биологических материалах.

Широко применяются мазки и микроскопия нативных препаратов влагалищных смывов, эякулята, осажденной мочи.

Культуральный способ диагностики (посев, мазок на флору)

Забор материала у женщины:

• Стенка цервикального канала. Мазок берет врач-гинеколог (венеролог) или акушерка. Стерильный тампон вводят в полоть шейки матки, извлекают и аккуратно упаковывают в стерильную пробирку.
• Влагалище. Мазок выполняется стерильным тампоном, которым врач или акушерка проводят по стенке влагалища. Тампон помещается в стерильную пробирку.
• Анализ мочи. Сплошная порция мочи собирается в стерильную посуду.

Внимание! накануне сбора анализа на чувствительность, «на флору» – за сутки запрещено подмываться, принимать ванну и душ. Стерильный тампон с материалом или моча помещаются в стерильную, герметично закрывающуюся пробирку и быстро доставляются в лабораторию для выполнения анализа

Забор материала у мужчины:

• Анатомия мужского организма снижает риск заражения, но абсолютно не способна его исключить. Забор материала на диагностические исследования проводится в условиях медицинской организации врачом урологом или венерологом.
• Забор эякулята производится в стерильную банку. По завершении мастурбирования выделившийся эякулят собирается в стерильную пробирку.
• Моча сдается по тому же принципу, что и у женщин, в стерильную посуду.
• Секрет предстательной железы врач собирает на стерильный тампон или предметное стекло после ректального массажа простаты.
• Стерильный тампон с материалом или моча в стерильной, герметично закрывающейся пробирке срочно доставляются в лабораторию для выполнения анализа

Содержимое пробирок помещается на растущий куриный эмбрион/ куриный бульон или одну из специфических питательных сред.

Где в особых условиях изучается рост колоний простейших.

Дополнительные сапрофитные (безопасные) и условно-патогенные микроорганизме также станут прорастать.

Поэтому такой мазок называют мазком на флору.

Посев на чувствительность (обычно к метронидазолу (трихополу) или иным антипротозойным средствам) выполняется «ин витро», то есть в пробирке или чашке Петри.

Штаммы («породы») микроорганизмов в каждом поколении дают новые свойства.

Например, устойчивость к воздействию фармакологического препарата.

Поэтому наилучший клинический результат обеспечивается назначением терапии по результатам посева на чувствительность.

Лаборант наносит на чашку Петри разные лекарственные средства в обычной концентрации.

Спустя несколько дней изучает, каким оказался рост колоний под воздействием «лечения».

Неправильно именовать исследование устойчивым оборотом «бакпосев».

Так как никаких сопутствующих бактерий при исследовании на трихомониаз встретить мы не планируем.

В то же время трихомониаз коморбиден (родственен) иным заболеваниям с половым путем передачи.

Поэтому посев на наличие простейших сочетается с бактериальным посевом на гонококки.

А мазок «на трихомонады» сочетается с мазком «на гонорею».

Для культурального метода исследования необходимы значительные сроки изготовления.

Так как возбудитель должен адаптироваться ко внешней среде и продемонстрировать рост колоний.

Спустя 2-4 суток роста посев извлекается и рассматривается под микроскопом.

На следующий день обычно пациенты получают расшифровку анализа.

Посев на трихомониаз: частые вопросы пациентов

Посев на трихомонаду для мужчин и женщин выполняется по-разному?

Разница для пациентов разного пола заключается только в местах забора материала на исследование. Для женщин это канал шейки матки, влагалище и мочеиспускательный канал. Для мужчин – уретра, предстательная железа, эякулят, причем забор семенной и простатической жидкости делает врач

Когда назначают посев на наличие трихомонад?

Когда сдавать посев после заражения?

Посев будет информативен уже в инкубационный периоде. Но максимально благоприятен для диагностики манифест заболевания. Посев необходим для точного определения возбудителя, при непонятной клинической картине. торпидных формах течения болезни. Еще необходим контрольный посев, его выполняют через 2-3 недели по окончании лечения, чтобы убедиться в отсутствии возбудителя.

Когда можно брать после антибиотиков посев на трихомонады?

Если антибиотикотерапия назначалась по поводу другого заболевания, то она будет искажать первичную диагностику. Возможен ложно отрицательный результат посева, то есть колонии на питательной среде не станут прорастать. Следует подождать 1-2 недели по окончании курса антибиотиков, прежде чем сдавать анализ. Тот же принцип используется и при выполнении контрольного посева по окончании лечения. Но если имеется яркая клиника половой инфекции, посев может быть информативен и раньше, чем через пару недель после приема препаратов.

Каким врачом назначается посев на трихомонаду или гонорею?

Назначить такой анализ может любой врач, но если он не умеет забирать материал, то на посев направляют только мочу. Обычно эти назначения делает врач-венеролог или гинеколог.

Мазок у мужчины или женщины показал трихомониаз: что делать?

При наличии явной клинической картины анализ просто подтвердил диагноз. Если симптоматики нет, то нельзя исключить и ложноположительный результат. Но определить заболевание только по одному исследованию рискованно. Поэтому врач назначает ряд исследований. и по совокупности делает заключение о диагнозе. Показатели микроскопии желательно подтвердить при помощи ИФА или ПЦР.

Микроскопия нативных (живых) препаратов при трихомониазе

Материалом данного исследования являются эякулят, влагалищные смывы, осажденная моча.

Лаборант изучает внешний вид, количество, активность простейших.

Материал нужно срочно, за 2 часа, доставить в лабораторию, иначе трихомонады погибнут и не будут обнаружены.

Мазки на трихомониаз

Мазок, в отличие от нативного препарата, окрашивается метиленовым синим или по специальным авторским методикам (Грам, Романовский-Гимзе).

Поэтому долго сохраняется пригодным для изучения.

Дополнительно в мазках можно выявить прочие признаки воспаления, провести генетический анализ.

Диагностика урогенитального трихомониаза у женщин несколько отличается от таковой у мужчин.

Мазки у женщин берутся со свода влагалища. цервикального канала

Подготовка женщины к исследованию на трихомонады

За сутки до забора материала не спринцеваться.

За 3-4 часа не мочиться.

При бессимптомном течении проводится провокация.

Для этого накануне вводится гоновакцина или пирогенал, что усиливает клинические проявления заболеваний и обеспечивает исследователя достаточным количеством материала.

Помимо лекарственных или биологических препаратов, практикуется алкогольная провокация.

Для этого накануне пациент выпивает красное вино или пиво.

 Что берется для лабораторных исследований

• отделяемое канала шейки матки;
• смыв или аспират из влагалища;
• осажденная моча после центрифугирования.

Подготовка мужчин к исследованию на трихомонады

За 3-4 часа не мочиться.

При бессимптомном течении – провокация.

Что берется для лабораторных исследований

• отделяемое уретры (зондом или ложкой Фолькмана на 5-7 см в мочеиспускательный канал);
• секрет предстательной железы (после массажа простаты);
• эякулят;
• центрифугат свежевыведенной мочи.

Расшифровка результатов выполняется врачом-клиническим лаборантом.

Обнаруживают грушевидные или овальные простейшие с жгутиками.

Интерпретация микроскопии бывает ошибочной.

Ложноположительный результат: при микроскопии за простейших принимают клетки эпителия.

Ложноотрицательный результат: при микроскопии в забор попало много посторонних клеток.

Или возбудителей мало и их не оказалось именно во взятом материала (низкий титр возбудителя).

Возможно, инкубационный период был слишком короток, паразиты не успели вырасти до видимых размеров.

При неудачах лечения посев повторяют еще раз спустя 2-3 недели.

Тем не менее, культуральный и микроскопический методы распространены и активно применяются в диагностике трихомониаза и гонореи.

Мазок на трихомониаз: вопросы пациентов

В расшифровке мазка указано: трихомониаз, разрушенные клетки эпителия. Что это значит?

Это значит, что при микроскопии увидели простейших, вызывающий урогенитальный трихомониаз, к тому же интенсивно идет процесс воспаления.

Откуда берут мазки на трихомониаз у женщин?

Мазки берет врач на кресле из канала шейки матки, уретры и стенки влагалища. Трихомонады также находят в моче, при этом можно как посмотреть под микроскопом на живые клетки, так и окрасить мочу на мазке. У женщин шприцом забирают аспират содержимого полости матки как анализ на трихомониаз.

Как сдавать анализ мочи на трихомонаду?

Для анализа требуется свежая порция утренней мочи, так как перед сбором не нужно мочиться в течение 3-4 часов, а также спринцеваться и подмываться. Моча проходит центрифугирование и осаждается, то есть отстаивается после центрифуги. Этот материал попадает под микроскоп, предварительно окрашиваясь. Для мужчин используется также центрифугирование эякулята, окрашенного по Маю-Грюнвальду-Гимзе, что информативнее осмотра нативного препарата.

Отличаются ли методы окраски у мужчин и женщин?

Отличия зависят от материала, поэтому эякулят и секрет простаты окрашивают по Маю-Грюнвальду-Гимзе или по Романовскому-Гимзе, аспират влагалища – по Граму. Практически все материалы можно покрасить метиленовым синим, хотя точность будет ниже. Моча окрашивается одинаково для обоих полов.

Альтернативные методы диагностики трихомониаза

Для постановки не обязательно увидеть непосредственно возбудитель.

Можно попытаться обнаружить его ДНК илиотследить реакцию организма пациента именно на данный вид инфекционного или паразитарного агента

ПЦР – полимеразная цепная реакция – генодиагностический метод.

Направлен на обнаружение ДНК или нуклеиновых кислот возбудителя.

Метод не дешев, но точен, особенно при торпидной форме заболевания. 

ПЦР определяет мишени генома вирусов. бактерий и одноклеточных организмов, что весьма востребовано в венерологии.

Чувствительность ПЦР - 97%. тогда как посев – 80%. а микроскопия мазка – всего 36%.

Культуральный метод, считающийся «золотым стандартом», способен пропустить около 10 из 100 случаев трихомониаза, затем подтвержденных ПЦР.

По данным японских специалистов, ПЦР одинаково часто с микроскопией обнаруживает хламидии, но в два раза чаще – гонококки и трихомонады.

Генетические тесты назначают при сомнительны посевах, смешанных инфекциях, для контроля излеченности.

Иммунологическая диагностика - иммунологический анализ крови, влагалищного содержимого. эякулята на антитела к трихомонаде.

Иммунологическому анализу подвергается также содержимое уретры или влагалища.

Иммуноблот позволяет варьировать антигенные маркеры: прямая и непрямая агглютинация, флюоресценция антител, метод комплемента и собственно иммуноферментный анализ.

От чего зависит иммунный ответ:

• характер патогена/ антигена (особенности самой трихомонады);
• концентрация патогенов/антигенов в материале;
• показатели стимуляции иммунной системы: перенесенные ранее болезни, длительность настоящего случая.

Иногда получается ложноотрицательная реакция, так как возбудитель слаб или система иммунитета к нему не чувствительна.

При иммуносупрессии реакция скорее всего будет ложноотрицательной.

Ложноположительная реакция бывает, если пациент ранее перенес трихомониаз, так как антитела долго остаются в сыворотке крови.

Есть анализ, направленный на поиск в мазках вагинального соскоба специфических белков трихомонад в биологических пробах с использованием антител моноклональных.

Метод быстрый (в течение часа), но практически столь же точный, что и культуральный (посев).

Особенно удобно применять ИФА мазков для контроля лечения.

ПИФ (прямая иммунофлюоресценция), ИФА (иммуно-ферментный анализ) не очень точны именно при диагностике трихомониаза.

На ранних этапах заболевания иммунологический анализ на антитела к трихомонаде бессмысленен.

Так как иммунитет не успевает отреагировать на вторжение простейших.

Его выполняют только когда иммуноглобулины появляются в крови, то есть после окончания продромального периода инфекции (1-3 недели).

При качественном анализе в венозной крови обнаруживаются иммуноглобулины класса G к трихомонаде.

При количественном анализе изучается титр антител (их количество в мл); при трихомонадной инфекции титр снижается медленно.

Сроки появления антител после инфицирования и сроки их исчезновения после излечения ограничивают информативность иммунологических тестов.

Для контроля излечения они не употребляются, так как сохраняются в крови около года.

ПЦР на трихомониаз: вопросы пациентов

Можно ли проводить ПЦР во время менструации?

Нет, ни во время менструации, ни в течение еще 5 дней материал на ПЦР не забирают. При гонорее месячные могут служить естественной провокацией, поэтому для микроскопии по окончании кровянистых выделений маки берутся. Но для ПЦР они тоже не пригодны в течение 5 дней.

Как убрать из крови антитела к трихомонадам?

Никак.  Постепенно они сами уйдут в течение года.

Взаимоисключающие результаты: антитела к трихомонадам отрицательные, а ПЦР положительный или наоборот?

Увы, 100% точной диагностики не существует. Но ПЦР редко дает ложноотрицательные результаты и совсем не допускает ложноположительных. Титр может быть низок или антител нет при выраженнм снижении иммунитета. а вот ДНК или его следы перепутать невозможно. В Вашем примере нужно ориентироваться на ПЦР. Если ПЦР отрицательна, а ИФА положительна, то скорее всего. возбудителя больше нет в организме. но напряженность иммунного ответа сохраняется после недавней болезни.  

Сравнение методов диагностики трихомониаза

Совершенства в реальном мире достичь невозможно.

В полной мере это утверждение относится и к лабораторной диагностике трихомониаза.

При яркой и убедительной клинической картине для предварительного диагноза достаточно микроскопии живого препарата или мазка.

Но в дальнейшем спектр исследований расширяется.

Стертая или торпидная форма болезни потребует большей точности.

«Золотым стандартом» диагностики считают посев, то есть культуральный метод.

Он убедителен, не дает ложноположительных результатов, но занимает время около недели.

Иммунологический метод быстрее, но не может применяться в инкубационный период или для контроля лечения.

В первом случае антител еще не будет.

А во втором титр не успеет снизиться, и отличить болезненный процесс от последствий не получится.

При выборе метода врач-венеролог (а какой еще врач направляет на диагностику инфекций, передающихся половым путем?) ориентируется на особенности организма пациента.

Как выявляется трихомонада у мужчин:

• диагностика трихомониаза сложнее, невозможно использовать только один анализ на трихомонаду;
• возбудители в уретре менее подвижны;
• площадь расположения патогенного агента меньше, есть риск ложноотрицательного результата;
• забор материала субъективно неприятнее, могут быть случаи отказа от исследований;
• проводится комбинация как материалов, так и методов диагностики.

Клиническая картина у мужчин также менее выраженная, зато склонность к носительству ничуть не меньше.

Подтверждением служит молекулярно-биологический метод, ПЦР, посев.

Для женщин сдать анализ на трихомонады субъективно проще.

Материала скорее всего будет достаточно для постановки диагноза при ПЦР, посеве, да и микроскопия позволит установить истину в первом приближении.

Отложить диагностику может заставить менструация, но и она способна сыграть роль естественной провокации при стертой форме заболевания.

Влияют на выбор метода диагностики и сопутствующие заболевания.

Гонорея имеет похожую симптоматику. но у женщин обычно проявляется скудными симптомами.

Микроскопия позволит увидеть и простейших, и гонококки в одном мазке.

Посев также обеспечит рост всех имеющихся возбудителей.

А вот альтернативные методы специфичны и не могут «заодно» выявить что-то другое.

При бартолините – воспалении желез в преддверии влагалище – поражаются бартолиновы железы.

Именно они обеспечивают естественную смазку и увлажнение влагалища.

При трихомонадной инфекции, гонорее, молочнице выводные каналы желез закрываются выделениями, начинается воспаление.

Поэтому при появлении уплотнений, болезненности, местном повышении температуры проводят посев на трихомоноз и иные возбудители ЗППП.

Лабораторная диагностика выполняется на всех этапах лечения: первично, в динамике, для контроля.

Через 14 дней по окончании курса лечения проводят:

• микроскопию;
• NASBA (генетический метод поиска специфичных РНК);
• культуральный метод (посев «на флору»).

Через 30 дней по окончании курса лечения проводят ПЦР.

Таким образом, невозможно ответить: какой анализ на трихомонаду лучше.

Все зависит от условий проведения диагностического тестирования, особенностей как колонии возбудителей.

Также и от самого пациента, стадии заболевания и даже материальных возможностей клиники.
 

Где лучше всего сдавать анализы на трихомониаз

• Там, где забор материала выполняется специалистом по венерическим болезням постоянно, «на потоке».
• Там, где обеспечивается контроль стерильности инструментария.
• Там, где присутствует самая современная диагностика. Например, в последние годы появились экспресс-методы ПЦР или усиленной микроскопии.
• Там, где специалисты будут проводить своевременное и лабораторно контролируемое лечение
• Там, где Вам предоставят наиболее полную и понятную информацию, где пациента уважают как равного участника борьбы с заболеванием.

 

Для диагностики трихомониаза обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.